a Abertura e o fechamento da fibrose cística da condutância transmembrana da regulator (CFTR) do canal de cloro controlados pelo ATP binding e hidrólise por sua nucleotide binding domínios (NBDs). Isto é presumido para controlar a abertura de uma única” porta ” dentro do caminho de permeação, no entanto, a localização de tal porta não foi descrita., Usámos o adesivo clamp para monitorizar o acesso dos reagentes citosólicos de cisteína reactivos às cisteínas introduzidas em diferentes regiões transmembranares (TM) numa forma de TFTR sem cisteína. A taxa de modificação da Q98C (TM1) e I344C (TM6) pelo methanethiosulfonate (MTSES) e permeant Au(CN)2− íons foi reduzida quando a concentração de ATP, foi reduzido de 1 mM a 10 µM, e a modificação por MTSES foi acelerada quando 2 mM pirofosfato foi aplicada para evitar canal de encerramento. A modificação do K95C (TM1) e do V345C (TM6) não foi afectada por estas manobras., Nós também manipulamos gating introduzindo as mutações K464A (em NBD1) e E1371Q (em NBD2). A taxa de alteração do Q98C e do I344C por MTSES e Au(CN)2− foi diminuída pelo K464A e aumentada pelo E1371Q, enquanto a alteração do K95C e do V345C não foi afectada. Estes resultados sugerem que o acesso do citoplasma para K95 e V345 é similar em canais abertos e fechados. Em contraste, modificando o canal dependente de ATP alterando o acesso a Q98 e I344, localizado mais adiante no poro., Propomos que a gatação ATP-dependente de TFTR esteja associada à abertura e fecho de uma porta dentro da via de permeação ao nível destes aminoácidos de revestimento de poros.