qu’est-ce que L’affinité de liaison?

l’affinité de liaison est la force de l’interaction de liaison entre une seule biomolécule (p. ex. protéine ou ADN) et son ligand / partenaire de liaison (p. ex. médicament ou inhibiteur). L’affinité de liaison est généralement mesurée et rapportée par la constante de dissociation d’équilibre (KD), qui est utilisée pour évaluer et classer les forces d’ordre des interactions bimoléculaires. Plus la valeur KD est petite, plus l’affinité de liaison du ligand pour sa cible est grande., Plus la valeur KD est grande, plus la molécule cible et le ligand sont faiblement attirés et se lient l’un à l’autre.

l’affinité de liaison est influencée par les interactions intermoléculaires non covalentes telles que la liaison hydrogène, les interactions électrostatiques, Les forces hydrophobes et de Van der Waals entre les deux molécules. De plus, l’affinité de liaison entre un ligand et sa molécule cible peut être affectée par la présence d’autres molécules.

Pourquoi devrais-je mesurer l’affinité de liaison pour mon application?,

chaque fois que vous caractérisez des protéines, des acides nucléiques et toute biomolécule, comprendre l’affinité de liaison aux substrats, aux inhibiteurs et aux cofacteurs est la clé de l’appréciation des interactions intermoléculaires conduisant aux processus biologiques, à la biologie structurale et aux relations structure-fonction.

pour la découverte de médicaments, l’affinité de liaison est également mesurée pour classer les coups de liaison à la cible et aider à concevoir des médicaments qui lient leurs cibles de manière sélective et spécifique.,

Il existe de nombreuses façons de mesurer l’affinité de liaison et les constantes de dissociation, telles que les tests ELISA, les tests GEL-shift, les tests pull-down, la dialyse à l’équilibre, l’ultracentrifugation analytique, la résonance plasmonique de surface et les tests spectroscopiques.

quelles solutions d’affinité de liaison Malvern Panalytical propose-t-elle?

Malvern Panalytical propose la calorimétrie par titrage isotherme (ITC), une technique d’analyse directe et sans étiquette qui mesure l’affinité de liaison entre deux molécules qui interagissent l’une avec l’autre, comme une protéine et un ligand., ITC mesure le changement de chaleur associé à l’événement de liaison, et est considéré comme le « Gold Standard” de l’analyse des interactions car il permet l’étude d’un large éventail d’interactions et fournit des valeurs KD hautement quantitatives.

ITC mesure les valeurs de KD dans la gamme millimolaire à nanomolaire et détermine la stœchiométrie de liaison et la thermodynamique de liaison de l’interaction, qui sont également importantes dans la caractérisation des interactions intermoléculaires.,

Les avantages de L’utilisation de L’ITC, par rapport à d’autres tests de liaison, sont les suivants:

• toutes les interactions de liaison ont un changement d’enthalpie – la chaleur est libérée ou absorbée
• L’ITC peut être utilisé pour caractériser une liaison simple 1:1 et des événements de liaison multiples complexes.,
• polyvalence-L’ITC peut être effectué avec n’importe quel échantillon, dans la plupart des tampons entre pH2-12
• Non optique et non spectroscopique
• pas de marquage-peut utiliser des molécules natives
• En solution-pas d’immobilisation nécessaire
• Non destructif – peut récupérer l’échantillon après l’expérience de liaison
• développement?,

  Le MicroCal PEAQ-ITC est le dernier calorimètre de titrage isotherme de Malvern Panalytical et est conçu pour la performance et la qualité, avec des flux de travail guidés, un logiciel de conception expérimentale et un module wash entièrement intégré pour des données toujours de haute qualité. Le MicroCal PEAQ-ITC a un volume cellulaire de 200 µL pour une consommation minimale d’échantillons précieux. La cellule de réaction est faite avec Hastelloy, qui est non réactif et facile à nettoyer. La détection de chaleur est sensible pour la mesure experte des valeurs de KD nanomolaires., Le PEAQ-ITC est livré avec un logiciel d’analyse de données robuste, rapide et non subjectif et peut être automatisé pour une productivité accrue.