ce este afinitatea de legare?
afinitatea de legare este puterea interacțiunii de legare între o singură biomoleculă (de exemplu, proteină sau ADN) și partenerul său de ligand / legare (de exemplu, medicament sau inhibitor). Afinitatea de legare este de obicei măsurat și raportat de echilibru constanta de disociere (KD), care este folosit pentru a evalua și pentru rang forte ale bimolecular interacțiuni. Cu cât valoarea KD este mai mică, cu atât este mai mare afinitatea de legare a ligandului pentru ținta sa., Cu cât valoarea KD este mai mare, cu atât mai slab molecula țintă și ligandul sunt atrase și se leagă unul de celălalt. afinitatea de legare este influențată de interacțiunile intermoleculare non-covalente, cum ar fi legarea hidrogenului, interacțiunile electrostatice, forțele hidrofobe și Van der Waals între cele două molecule. În plus, afinitatea de legare între un ligand și molecula țintă poate fi afectată de prezența altor molecule.
de ce ar trebui să măsor afinitatea de legare pentru aplicația mea?,
ori de câte ori sunt caracterizează proteine, acizi nucleici, și orice biomolecule, înțelegerea afinitate pentru substraturile, inhibitori, și cofactori este esențială pentru aprecierea interacțiunile intermoleculare de conducere a proceselor biologice, structural biologie, și de structură-funcție de relații. pentru descoperirea de droguri, afinitate de legare este, de asemenea, măsurată ca rang hit-uri de ordine de legare la țintă și de a ajuta la proiectarea de medicamente care se leagă obiectivele lor selectiv și în mod specific.,
Există multe modalități de a măsura afinitate și constantele de disociere, cum ar fi ELISAs, gel-shift teste, pull-down teste, dializa la echilibru, ultracentrifugare analitică, surface plasmon resonance, și spectroscopice teste.
ce soluții de afinitate de legare oferă Malvern Panalytical?
Malvern Panalytical oferă Calorimetrie izotermică de titrare (ITC), care este o tehnică analitică directă, fără etichete, care măsoară afinitatea de legare între oricare două molecule care interacționează între ele, cum ar fi o proteină și un ligand., ITC măsoară schimbarea de căldură asociată evenimentului de legare și este considerat „standardul de aur” al analizei interacțiunii, deoarece permite studiul unei game largi de interacțiuni și oferă valori KD foarte cantitative. ITC măsoară valorile KD în intervalul milimolar-nanomolar și determină stoichiometria de legare și termodinamica de legare a interacțiunii, care sunt de asemenea importante în caracterizarea interacțiunilor intermoleculare., avantajele utilizării ITC, în comparație cu alte teste de legare, sunt:
- toate interacțiunile de legare au o schimbare de entalpie – căldura este fie eliberată, fie absorbită
- ITC poate fi folosit pentru a caracteriza legarea simplă 1:1 și evenimentele complexe de legare multiplă.,
- Versatilitate – ITC pot fi efectuate cu orice probe, în cele mai multe tampoane între pH2-12
- Non-optice și non-spectroscopice
- Nici o etichetare – se poate folosi nativ molecule
- În soluție – nu imobilizarea necesare
- Non-distructive – pot recupera eșantion după legarea experiment
- Minim test de dezvoltare
de Ce ar trebui să aleg un Malvern Panalytical LENOVO produs?,
MicroCal PEAQ-ITC este cea mai recentă izoterma de titrare calorimetru din Malvern Panalytical și este proiectat pentru performanta si calitate, cu ghid fluxuri de lucru, experimentale, de proiectare software și un sistem complet integrat de spălare modul pentru calitatea constant ridicată a datelor. MicroCal PEAQ-ITC are un volum de celule de 200 µL pentru un consum minim de probe prețioase. Celula de reacție se face cu Hastelloy, care este non-reactiv și ușor de curățat. Detectarea căldurii este sensibilă pentru măsurarea expert a valorilor nanomolare KD., PEAQ-ITC vine cu un software robust, rapid și non-subiectiv de analiză a datelor și poate fi automatizat pentru o productivitate crescută.