Abstract
fundal. Obiectivul acestei lucrări este de a demonstra efectul extractului de Gynostemma pentaphyllum asupra fibroblastelor dermice de șoarece. Studii recente au arătat că această plantă poate avea proprietăți antioxidante mari, care pot fi foarte benefice în combaterea stresului oxidativ. Metode. Gynostemma pentaphyllum extract a fost preparat și mouse-ul fibroblaste dermice au fost obținute și cultivate ca pe protocoalele noastre de laborator., Douăsprezece probe de celule au fost cultivate în aceleași condiții și au fost stabilite atât controale negative, cât și pozitive. Inducerea stresului oxidativ a fost efectuată utilizând lumina ultravioletă c (UVC). Numărul de celule viabile a fost efectuat, folosind microscopie. Analiza rezultatelor generale a fost procesată utilizând versiunea SPSS 16.0. Rezultate. Analiza statistică a arătat o corelație pozitivă puternică între concentrația de Gynostemma pentaphyllum și durata medie a viabilității celulare (rs = 1), cu un nivel ridicat de semnificație statistică ()., De asemenea, a existat o corelație pozitivă puternică între studiile de viabilitate celulară (rs = 0.988–1), cu semnificație statistică (). Concluzie. Extractul Gynostemma pentaphyllum prelungește viabilitatea fibroblastelor dermice de șoarece deteriorate de stresul oxidativ indus de lumină UVC. Rezultatele arată beneficiile potențiale ale acestui extract asupra îmbătrânirii celulelor dermice.
1. Introducere
întârzierea și controlul îmbătrânirii pielii constituie una dintre cele mai mari provocări cu care se confruntă cercetătorii și oamenii de știință din domeniul cosmetologiei., Acest domeniu de studiu este cercetat continuu, datorită urmăririi nesfârșite a menținerii tinereții și a aspectului. Multe investigații științifice sunt în curs de desfășurare, pe măsură ce domeniul dezvoltării cosmeceutice se lărgește. Noile studii dezvăluie adevărul despre mulți agenți care modifică procesul de îmbătrânire a pielii. Viitoarea încorporare a acestor studii în practica clinică ar schimba modul în care acest proces este gestionat în prezent.multe extracte de plante joacă un rol vital în modificarea îmbătrânirii pielii., Unele dintre acestea au fost investigate temeinic, în timp ce altele au fost folosite empiric doar de secole. Gynostemma pentaphyllum, denumit în mod obișnuit „Jiaogulan” în China, este unul dintre numeroasele exemple ale acestor plante .această plantă este cultivată în mod normal în regiunile muntoase din China și este considerată viță de vie datorită modelului său de creștere. Acesta a fost folosit de secole ca un remediu tradițional pentru afecțiuni respiratorii și toxice și a fost, de asemenea, asociat cu longevitatea, printre alte beneficii .,multe studii au fost făcute pentru a verifica unele dintre numeroasele credințe asociate cu utilizarea acestei plante medicinale; cu toate acestea, conform cercetărilor ample efectuate înainte de această propunere, nu au fost documentate sau publicate studii privind acțiunea extractului de plante asupra fibroblastelor dermice.obiectivul acestei lucrări este de a studia efectele extractului Gynostemma pentaphyllum asupra fibroblastelor dermice, deoarece se referă la îmbătrânirea pielii. Ipoteza acestui studiu este îndreptată în favoarea acestui extract de plante, ca fiind un factor care contribuie semnificativ la procesul de întârziere a îmbătrânirii pielii., Acest studiu are o mare importanță științifică și va contribui în continuare la înțelegerea completă a beneficiilor acestei plante medicinale. Această lucrare deschide posibilitatea dezvoltării de produse cosmeceutice bazate științific, concepute pentru a combate semnele îmbătrânirii pielii.
2. Materiale și metode
(1)prepararea extractului Gynostemma pentaphyllum: 100 mL de apă distilată dublă a fost încălzită până la punctul de fierbere (100°C). 100 mg din planta Gynostemma pentaphyllum a fost macerată și adăugată la apa distilată dublă la punctul de fierbere., Amestecul a fost apoi lăsat să se răcească la temperatura camerei. Soluția a fost sterilizată cu filtre de 0,22 micrometri, sigilată și depozitată ulterior la un 4C în frigider. O varietate de concentrații diferite ale extractului au fost obținute ulterior din soluția inițială.(2) fibroblastele dermice de șoarece au fost obținute și cultivate conform protocoalelor stabilite de laboratorul nostru al Departamentului de Dermatologie al Spitalului General al Universității Medicale din Tianjin. Douăsprezece probe de celule au fost cultivate în aceleași condiții., Una dintre cele douăsprezece probe a fost utilizată ca martor pozitiv și a fost menținută în condiții optime pe parcursul întregului experiment, fără expunere la agresiuni sau stimulente.(3) celelalte unsprezece probe au fost plasate sub 8 wați—lumină ultravioletă c (UVC) la o distanță de 50 cm pentru a induce stres oxidativ. Inducerea stresului oxidativ a fost limitată la 1,5 ore.(4) ulterior, unul dintre cele unsprezece eșantioane a fost plasat în condiții optime pe tot parcursul restului experimentului, fără a mai fi expus la agresiuni sau stimulente. Acest eșantion a fost considerat drept controlul negativ.,(5)celelalte zece probe au fost expuse la cantități similare de diferite concentrații de Gynostemma pentaphyllum extras și, ca și cu restul probelor, acestea au fost corect etichetate și puse în condiții optime de-a lungul restul de experiment, fără nici o altă expunerea la agresiuni sau stimulente.(6) analiza calitativă a viabilității celulare a fost efectuată utilizând microscopia, conform standardelor noastre de laborator, la zero ore, urmată de intervale ulterioare.(7) întreaga procedură a fost repetată oficial de două ori, pentru un total de trei încercări.,(8) rezultatele obținute în urma observațiilor periodice au fost documentate cu atenție și acuratețe.(9) analiza rezultatelor globale a fost procesată folosind versiunea SPSS 16.0. Coeficientul de corelație al lui Spearman a fost utilizat pentru a demonstra relația dintre variabilele utilizate.(10) rezultatele au fost prezentate folosind diagrame și tabele.
3. Rezultatele
lumina UVC a indus un nivel maxim de stres oxidativ la 1,5 ore de expunere (vezi Tabelul 1 și Figura 1). După această perioadă, semnele de apoptoză au fost clar vizibile (vezi figurile 4, 5, 6 și 7)., Analiza calitativă a viabilității celulare a arătat că o concentrație optimă de Gynostemma pentaphyllum (luată ca 4,5 mg/mL) a prelungit semnificativ viabilitatea celulelor expuse la lumina UVC (vezi Tabelul 2 și figurile 2 și 3). Analiza statistică a arătat o corelație pozitivă puternică între concentrația de Gynostemma pentaphyllum și durata medie a viabilității celulare (rs = 1) cu un nivel ridicat de semnificație statistică () (Vezi Tabelul 3(a)). De asemenea, a existat o corelație pozitivă puternică între studiile de viabilitate celulară (rs = 0.988–1) cu semnificație statistică () (vezi Tabelul 3(b)).,
Relationship between cell viability and exposure to UVC light. For qualitative analysis of cell viability: 4—all cells viable; 3—more viable cells than apoptotic cells; 2—more apoptotic cells than viable cells; 1—total apoptosis.
Relationship between cell samples and the duration of cell life., For qualitative analysis of cell viability: 4—all cells viable; 3—more viable cells than apoptotic cells; 2—more apoptotic cells than viable cells; 1—total apoptosis.
Relationship between cell viability and exposure to Gynostemma pentaphyllum following UVC light-induced oxidative stress.,
Photographs of various stages of the investigation (magnification 40x, no stain used). All cells viable.
Photographs of various stages of the investigation (magnification 40x, no stain used). More viable cells than apoptotic cells.,
Photographs of various stages of the investigation (magnification 40x, no stain used). More apoptotic cells than viable cells.
Photographs of various stages of the investigation (magnification 40x, no stain used). Total apoptosis.
4., Gynostemma pentaphyllum aparține familiei Cucurbitaceae și a fost asociată cu tratamentul cancerului, ulcerului gastric, hepatitei, bolilor respiratorii și hiperlipidemiei, printre alte patologii. Unul dintre cele mai recent descoperite beneficii ale acestei plante este proprietățile sale antioxidante .mecanismele exacte implicate în fiziopatologia îmbătrânirii pielii indică faptul că stresul oxidativ joacă un rol vital în progresul acestui proces., Orice măsuri care pot fi luate pentru a suprima producția de radicali liberi vor facilita păstrarea tinereții pielii. După cercetări aprofundate asupra unora dintre antioxidanții naturali, Gynostemma pentaphyllum pare a fi unul dintre cele mai promițătoare. Rezultatele noastre indică faptul că Gynostemma pentaphyllum este eficient în prelungirea duratei de viață a fibroblastelor dermice de șoarece și că acest efect crește într-o manieră dependentă de doză.multe studii au fost făcute pentru a afirma potențialul Gynostemma pentaphyllum ca antioxidant., Celulele utilizate în majoritatea studiilor variază foarte mult, dar rezultatele sunt toate semnificative statistic. Acțiunea acestui extract de plante asupra fibroblastelor dermice nu a fost investigată, conform cercetării și revizuirii efectuate. În prezent nu sunt disponibile studii pentru a verifica efectul acestui extract asupra fibroblastelor dermice.Schild și colab. a demonstrat acțiunea protectoare a extractului de Gynostemma pentaphyllum pe felii de creier care au fost lipsite de oxigen și glucoză. Această deprivare a dus la apariția leziunilor celulare datorate stresului oxidativ., Rezultatele au arătat că utilizarea acestui extract, în decurs de 48 de ore de la cultivarea celulelor, a crescut nivelul de proteine și activitate al enzimelor antioxidante superoxid dismutază de mangan (mn-SOD) și peroxidază de glutation (GPx). În consecință, concentrația celulară de peroxid de hidrogen (H2O2) a rămas la un nivel scăzut. Efecte antioxidante similare au fost descrise în rezultatele studiului realizat de Zhang et al., care a afirmat proprietățile antioxidante ale extractului Gynostemma pentaphyllum asupra celulelor creierului ., De asemenea, rezultate favorabile semnificative au fost obținute de diferiți cercetători care au investigat, de asemenea, efectul antioxidant protector al Gynostemma pentaphyllum asupra celulelor creierului . Rezultatele noastre sunt în concordanță cu cele ale autorilor menționați mai sus, iar aceste rezultate validează eficacitatea acestui extract în combaterea stresului oxidativ.
Müller și colab. a contribuit în continuare la studii privind potențialul antioxidant al acestui extract de plante medicinale. Studiul a fost realizat folosind hepatocite care au fost expuse la substanțe care au indus stres oxidativ., Extractul a protejat complet celulele de apoptoza indusă de stresul oxidativ. Rezultate similare au fost obținute de Lin și colab. în investigația lor folosind hepatocite .alte studii efectuate, folosind fagocite și celule endoteliale, cum ar fi cea a lui Li și colab., au produs rezultate semnificative . Faptul că acțiunea acestui extract este nespecifică a creat baza pentru urmărirea anchetei noastre. Rezultatele noastre arată acum că acest extract este eficient în prelungirea duratei de viață a fibroblastelor dermice de șoarece expuse la stresul oxidativ indus de lumină UVC.,cercetările efectuate de Ma și Yang, la școala absolventă a Universității de știință și Tehnologie din Beijing au demonstrat că Gynostemma pentaphyllum ar putea curăța eficient radicalii liberi activi de oxigen . Zhu și colab. demonstrat în studiul lor, folosind radiații UV, că Gynostemma pentaphyllum nu numai că este un măturător de radicali liberi, dar posedă și funcția biologică de anti-iradiere .alte avantaje ale Gynostemma pentaphyllum au fost descoperite de alți cercetători. Gauhar și colab. a investigat efectul extractului de Gynostemma pentaphyllum asupra obezității., Acest studiu a fost realizat la nivel preclinic și a demonstrat rezultate semnificative. Mecanismul molecular de acțiune implicate stimularea oxidarea grăsimilor și absorbția glucozei prin activarea AMPK în L6 myotube celule, cu o scădere corespunzătoare în greutate, greutatea ficatului, și nivelul colesterolului din sânge la șoareci .pe scurt, studiul nostru arată că Gynostemma pentaphyllum este capabil să reducă efectele stresului oxidativ asupra fibroblastelor dermice de șoarece. Stresul oxidativ accelerează îmbătrânirea și apoptoza., În studiul nostru, prelungirea viabilității celulare după stresul oxidativ indus de UV a servit ca parametru pentru a deduce că extractul de pentaphyllum Gynostemma a acționat ca un antioxidant. Acest extract poate reduce semnificativ efectele stresului oxidativ asupra fibroblastelor dermice umane și poate reduce, de asemenea, îmbătrânirea și apoptoza acestor celule. Am efectuat o evaluare calitativă a mouse-fibroblaste dermice viabilitatea după expunerea la UVC, în prezența și absența de Gynostemma pentaphyllum extras, ca o primă etapă în curs de cercetare., Deoarece nu au fost disponibile rezultate inițiale publicate pe această temă, am început cercetarea noastră cu un studiu calitativ, in vitro. Având în vedere faptul că rezultatele noastre sunt promițătoare, echipa noastră ar proceda la efectuarea unui studiu cantitativ, preclinic, pentru a corobora rezultatele noastre inițiale. Sunt necesare mai multe cercetări și investigații pe această temă, pentru a obține mai multe informații despre mecanismul real de acțiune al extractului asupra celulelor dermice. Studiul nostru servește, de asemenea, ca bază pe care pot fi dezvoltate noi produse cosmeceutice, cum ar fi creme și loțiuni antiaging și antioxidante.
5., Concluzie
studiul nostru arată că extractul Gynostemma pentaphyllum are un efect pozitiv asupra viabilității fibroblastelor dermice de șoarece care au fost deteriorate de stresul oxidativ indus de lumină UVC. Există un nivel foarte ridicat de asociere între utilizarea Gynostemma pentaphyllum și prelungirea vieții celulare. Repercusiunile potențiale ale unei astfel de investigații sunt clar vizibile, deoarece această investigație creează o bază pentru studii suplimentare în acest domeniu al dermatologiei., În plus, sunt necesare cercetări mai profunde pe acest subiect special pentru a stabili comparații valide între rezultatele obținute și pentru a izola compușii efectivi care sunt responsabili pentru protejarea celulelor.
Conflict de interese
autorii declară că nu există conflict de interese în ceea ce privește publicarea acestei lucrări.,
Aprecieri
autorii acestei anchete ar dori să recunoască și să-și extindă recunoștința sinceră pentru Departamentul de Dermatologie și la Laboratorul de Dermatologie de la Tianjin Universitatea de Medicină Generală Spital, pentru acordarea de materialele necesare, de finanțare și sprijin pe parcursul acestei anchete.