El azul de metileno de eosina (EMB, también conocido como «formulación de Levine») es una tinción selectiva para bacterias gramnegativas. EMB contiene colorantes que son tóxicos para las bacterias grampositivas. EMB es el medio selectivo y diferencial para los coliformes. Es una mezcla de dos manchas, eosina y azul de metileno en la proporción de 6: 1. EMB es un medio microbiológico diferencial, que inhibe ligeramente el crecimiento de bacterias grampositivas y proporciona un indicador de color que distingue entre los organismos que fermentan lactosa (por ejemplo, E. coli) y aquellos que no lo hacen (por ejemplo.,, Salmonella, Shigella). Los organismos que fermentan lactosa muestran «colonias nucleadas» – colonias con centros oscuros.

E. coli en agar EMB

Este medio es importante en laboratorios médicos por distinguir los microorganismos patógenos en un corto período de tiempo.

• La rápida fermentación de la lactosa produce ácidos, que reducen el pH, lo que favorece la absorción del tinte por parte de las colonias, que ahora son de color púrpura-negro.
• Los No fermentadores de lactosa pueden aumentar el pH por desaminación de proteínas., Esto asegura que el tinte no se absorba. Las colonias serán incoloras.

en EMB si se cultiva E. coli, dará un brillo verde metálico distintivo (debido a las propiedades metacromáticas de los tintes, el movimiento de E. coli usando flagelos y los productos finales ácidos fuertes de la fermentación). Algunas especies de Citrobacter y Enterobacter también reaccionarán de esta manera a EMB.Este medio ha sido diseñado específicamente para desalentar el crecimiento de bacterias grampositivas.

EMB contiene los siguientes ingredientes: peptona, lactosa, Fosfato dipotásico, eosina Y (colorante), azul de metileno (colorante) y agar.,

también hay agares EMB que no contienen lactosa.